Устройства компьютеризированные четырехканальные для обнаружения в режиме реального времени флуоресцентной детекцией специфической последовательности нуклеиновых кислот методом полимеразной цепной реакции АНК

Назначение

Устройства компьютеризированные четырехканальные для обнаружения в режиме реального времени флуоресцентной детекцией специфической последовательности нуклеиновых кислот методом полимеразной цепной реакции «АНК» (далее по тексту -приборы) предназначены для мультиканального измерения концентрации конечного продукта полимеразной цепной реакции (ПЦР) в режиме реального времени.

Приборы применяются в клинико-диагностических лабораториях медицинских учреждений и в научно-исследовательских институтах различного профиля.

Описание

Принцип действия приборов основан на измерении флуоресцентного сигнала, испускаемого в ходе полимеразной цепной реакции под воздействием излучения возбуждения, в каждом цикле температурно-кинетической амплификации генетического материала, с использованием в ПЦР смеси специфических олигонуклеотидов-затравок, нуклеотидтрифосфатов и фермента полимеразы. Интенсивность флуоресцентного сигнала пропорциональна концентрации продукта ПЦР. Измерение концентрации продуктов ПЦР в режиме реального времени осуществляется введением в реакцию флуоресцирующих красителей, сообщающих об увеличении количества дезоксирибонуклеиновой кислоты (ДНК) искомого типа, пропорционального увеличению флуоресцентного сигнала.

Интенсивность флуоресцентного излучения, испускаемого образцом, измеряется фотометрической системой регистрации прибора и индицируется на экране монитора внешнего компьютера в относительных единицах. При этом результаты измерений линейны в диапазоне концентрации красителя (флуоресцеина) от 1,0 до 10,0*10’8 моль/л.

Конструктивно прибор выполнен в виде раздельных модулей: нижнего - теплового модуля (амплификатора) и верхнего - оптического блока, которые в сочетании образуют систему для амплификации и измерения продуктов ПЦР в режиме реального времени.

Оптический блок фотометрической системы регистрации содержит:

- систему возбуждения, состоящую из вольфрамовой галогенной лампы, теплового фильтра (стекло, поглощающее инфракрасное излучение), пятипозиционной карусели с оптическими фильтрами возбуждения;

- систему детектирования, основными компонентами которой являются пятипозиционная карусель с оптическими фильтрами регистрации, ФЭУ, обеспечивающий количественное определение флуоресценции в лунках.

Тепловой модуль (амплификатора) содержит термоциклер на основе элементов Пельтье, встроенную нагреваемую крышку и луночный блок для размещения 16, 32 или 96 образцов.

Управление системой осуществляется с внешнего IBM-совместимого компьютера с процессором Intel Pentium™ или Celeron™ с частотой не ниже 1,0 ГГц, оснащенного специальным программным обеспечением «ANK.exe».

Технические характеристики

Диапазон измерений флуоресценции, усл.ед.

Пределы отклонения от линейности (при измерении концентрации флуоресцеина в диапазоне концентраций от 1,0 до 10,0*10'8 моль/л), % Предел допускаемого среднего квадратического отклонения результата измерения, %

Объем проб для анализа, мкл

Количество лунок для пробирок с пробами

Диапазон рабочих температур термостатирования, °C,

Разброс температуры по лункам, °C

Скорость изменения температуры в цикле, °С/сек, не менее

Количество каналов возбуждения и регистрации флуоресценции

Длины волн возбуждения флуоресценции, нм

Длины волн регистрации флуоресценции, нм

Напряжение питающей сети, В

Частота питающей сети, Гц

Потребляемая мощность, ВА, не более

Габаритные размеры (ВхШхГ), мм, не более

Масса, кг, не более

Рабочий диапазон температуры окружающей среды, °C

Рабочий диапазон относительной влажности окружающего воздуха (при 25 °C), % Рабочий диапазон атмосферного давления, кПа

от 10 до 70000

±20

5,0

от 5 до 100

16, 32 или 96

от 4 до 99 ±0,4 1,2

4

485,530, 580, 630

520,560, 620, 670

220 ± 22

50

800

370x450x450

26

от 15 до 35

от 20 до 80

от 84 до 106

Знак утверждения типа

Знак утверждения типа наносят на титульный лист руководства по эксплуатации типографским способом и на шильдик прикрепленный к прибору.

Приложение к свидетельству №                                                                  СтраницаЗ

об утверждении типа средства измерений                                                                   Страниц 4

Комплектность

Устройства компьютеризированного четырехканального для обнаружения в режиме реального времени флуоресцентной детекцией специфической последовательности нуклеиновых кислот методом полимеразной цепной реакции «АНК» имеют следующую комплектность:

Поверка

Устройства компьютеризированного четырехканального для обнаружения в режиме реального времени флуоресцентной детекцией специфической последовательности нуклеиновых кислот методом полимеразной цепной реакции «АНК» подлежат первичной и периодической поверке в соответствии с методикой поверки раздел 10 Руководства по эксплуатации, утвержденной ГЦИ СИ ФГУ «Ростест-Москва» в декабре 2009 г.

Межповерочный интервал -1 год.

Средства поверки:

- аттестованные смеси-растворы флуоресцеина с концентрацией 1,25; 2,5; 5,0; 10,0*10’8 моль/л, приготовленные в соответствии с требованиями РМГ 60-2003 «ГСИ. Смеси аттестованные. Общие требования к разработке», погрешность приготовления не более ±5,0%. Процедура приготовления аттестованных смесей-растворов включена в методику поверки.

- флуоресцеин ТУ 6-09-2464-82 ч;

- весы электронные АТ201, номер по Государственному реестру 18949-99;

- дозаторы одноканальные переменного объема Pipetman Р исп. Р100 (20 - 100 мкл) и исп. Р1000 (200 -1000 мкл) номер по Государственному реестру 28123-04;

Приложение к свидетельству №                                                                  Страница4

об утверждении типа средства измерений                                                                   Страниц 4

- тестовая смесь PC «АМТЕтест», производства ЗАО «Синтол», смесь флуоресцентных красителей FAM и ROX с концентрацией 20*10'8 моль/л и погрешностью приготовления не более ±10,0%.

Нормативные документы

Технические условия ТУ 9443-003-04699534-2005.

ГОСТ Р 50444-92. «Приборы, аппараты и оборудование медицинские. Общие технические условия».

РМГ 60-2003 «ГСИ. Смеси аттестованные. Общие требования к разработке».

МИ 2639-2001. ГСИ. «Государственная поверочная схема для средств измерений массовой доли компонентов в веществах и материалах».

Заключение

Тип «Устройство компьютеризированное четырехканальное для обнаружения в режиме реального времени флуоресцентной детекцией специфической последовательности нуклеиновых кислот методом полимеразной цепной реакции «АНК»» утвержден с техническими и метрологическими характеристиками, приведенными в настоящем описании типа, метрологически обеспечен при выпуске из производства и в эксплуатации согласно государственной поверочной схеме МИ 2639-2001.

Выдано Регистрационное удостоверение Федеральной службы по надзору в сфере здравоохранения и социального развития РФ № ФС 022а2005/2163-05 от 23.08.2005 года.